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Dyne 제품 FAQ - Dyne PCR Purification Kit (A570)

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작성자 다인바이오 작성일12-07-20 17:10 조회4,801회 댓글0건

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Q: DNA 회수율이 낮아요.

è  Wash Buffer사용 전 에탄올 첨가했는지 유무를 확인합니다.
è  적절하지 못한 elution buffer를 사용 했는지 확인합니다. Kit내의 elution buffer 나 멸균된 3차 증류수 권장합니다. 또한 elution buffer 65℃에 pre- warming시킨 후 사용하면 더 좋은 결과를 얻을 수 있습니다.
è  elution buffer column membrane 중앙에 분주 했는지 확인합니다. 컬럼 중앙에 분주 하면 회수율이 높아집니다. <?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" />

 

Q: 회수한 DNA가 차후 실험에서 여러 enzyme 반응이 일어나지 않는 경우가 발생했어요.

è  Washing 과정을 정확히 실시 했는지 확인합니다. salt 가 많으면 enzyme 반응이 일어 나지 않는 경우가 빈번히 발생 하기도 합니다.
è  elution 과정을 수행 후 에탄올이 남아 있는지 확인합니다. 에탄올 잔여 유무 여부 확인은 agarose gel에 분주 할 때 DNA가 뜨는 경우가 발생하면 에탄올이 남아 있다는 증거입니다.
è  elution 과정 수행 후 primer dimer가 남아 있을 경우가 있습니다. 이 경우는 Binding step buffer 첨가 없이 centrifuge 단계를 한 번 더 수행 하거나, 35% guanidine hydrochloride 750ul 첨가 후 washing 과정을 수행해 봅니다.

 

Q: 회수한 DNA를 전기 영동한 결과 작은 smeared band가 보여요

è  변성된 single stranded-DNA가 혼합되어 있는 경우, elution DNA 95℃에서 2분간 히팅 시킨 후, 상온에서 서서히 식힙니다.  상온에서 서서히 식히는 과정에서 10mM Nacl을 첨가 합니다.

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