Product
 
Dyne Bio l Kits l Mutagenesis Kit
 
품번 DYK1140/DYK1142
품명 Dyne Multi Site-directed Mutagenesis core Kit
규격 10 rxns/20 rxns
제조사 Dyne Bio
 
+제품사양

제품설명

Dyne Multi site-directed mutagenesis kit 는 plasmid DNA에서 원하는 부분의 다중 돌연변이 생성에 이용한다. 이 제품은 PCR 증폭, Dpn I 제한효소처리, transformation의 3 단계로 구성한다. 첫 단계는 돌연변이 DNA 가닥을 생성하는 단계로, 원하는 서열에 변이를 도입하는 primer 를 제작하여 단일가닥 주형에 결합하고, DNA polymerase로 DNA 가닥을 연장한다. 그 다음 DNA ligase 로 각각의 primer 로 부터 생성된 DNA 조각들을 연결시켜 원하는 부분의 돌연변이가 일어난 plasmid 를 PCR 증폭으로 복제하게 된다. 두 번째 단계에서 PCR 반응이 끝난 후 Dpn I 제한효소를 처리하여 methylation 된 DNA를 제거한다. 마지막 단계에서 최종 반응물을 competent cell 에 transformation 하여 단일가닥 DNA를 이중가닥으로 변환시킵니다. Dyne Multi site-directed mutagenesis Kit는 간단하고 쉬운 방법으로 50%가 넘는 고효율의 다중돌연변이 성공률을 제공한다.


구성품목

•Dyne Multi Enzyme mixture

•Dyne Multi 10X Reaction buffer

•dNTP Mixture (2 mM each) •Dyne Control Plasmid

•Dyne Control Primer •Dpn I

•Sterile water


사용상의 주의

•Reaction buffer 와 dNTP 는 잦은 동결-해동과정을 피한다. 실험 시에 필요한 분량만큼 분주해서 사용하기를 권장한다.

•Plasmid 는 반드시 dam+ E.coli strain 에서 분리한 것만을 사용한다. JM110 나 SCS110 등의 dam E.coli strain에서 분리된 plasmid 는 Dpn I 에 의해 잘리지 않기 때문에 실험조건에 적합하지 않다.

•이 제품은 5kb 이하의 size 를 가진 plasmid 에 적합하다.


제품특징

•No subcloning

•High efficiency

•Site-direted mutagenesis in a single day


추가로 필요한 구성

•X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-galactopyranoside)

•IPTG (Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside)

 

보관온도

10X reaction buffer, DH5α competent cell : -80℃

그 외 모든 구성품 : -20℃

 

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