◆ 제품구성

◆ 보관온도

· -80℃

◆ 제품특징

· Strain: DH5α

· Genotype: F’ Φ80lacZ• ΔM15 •ƒ(lacZYA-argF)U169 deoR recA1 endA1 hsdR17(r_k-, m_k+) phoA supE44 thi-1 gyrA96 relA1

◆ 품질관리  

· Transformation efficiency: ~1 x 10⁹ cfu/μg of pUC19

◆ 응용분야

· Amplification and purification of plasmid DNAs

· Cloning with ligated DNA mixtures

· Cloning with Dyne TA/Blunt kits (Cat.# DYK1010, DYK1030)

· Construction of genomic DNA and cDNA libraries

◆ 제품설명

· 본 제품은 E. coli DH5α로 부터 얻은 고효율의 competent cell이다. 높은 효율(~1 x 10⁹ cfu/μg)로 supercoiled plasmid DNA (pUC19)로 형질전환된다. Plasmid 증폭, ligated DNA 형질전환, Dyne TA/Blunt Kit (Cat.# DYK1010, DYK1030)를 활용한 cloning에 적합하다.

◆ 주의사항

· Competent cell을 녹이거나 DNA Sample을 cell과 함께 혼합을 할 때, pipette을 사용하지 않는다.

· 한 번 녹인 Competent cell은 다시 얼리지 않는다.

· Blue/white colony 선별이 필요한 경우, X-Gal/ IPTG plates에 도말한다.

◆ 형질전환

·   SOC media를 상온에서 미리 녹인다.

→ 얼음에서 competent cell이 포함된 tube를 녹인다.

→ Tube에 DNA sample 1~10 μl를 첨가한 후 부드럽게 섞는다.

→ 얼음에서 30분간 둔다.

→ 30초간 42℃에서 30초동안 열을 가한 후 얼음에서 2분간 둔다.

→ 상온에서 미리 녹인 SOC media 400 μl를 각 tube에 첨가한다. (Clean bench 안에서 진행한다.)

→ 37℃에서 1시간동안 shaking incubation한다.

→ 20~200 μl의 sample을 상온에서 미리 데워진 plate에 도말한다.

→ 37℃에서 overnight incubation한다. Plate는 뒤집은 상태로 incubation 한다. 다음날 colony를 확인한다.

◆ 제품종류